1 主題內容和適用范(fan)圍
1.1 主(zhu)題內容(rong)
　　本標準規定(ding)了測定(ding)水和污(wu)水中生化(hua)需氧(yang)量（BOD）的微生物傳感器快速(su)測定法。
　　本標(biao)準規定的(de)(de)(de)生物化學需氧(yang)量是指水(shui)和(he)污水(shui)中(zhong)溶(rong)解性可生化降解的(de)(de)(de)有機物在微生物作用下(xia)所消耗溶(rong)解氧(yang)的(de)(de)(de)量。
1.2 適用范圍
本方法(fa)適用于地(di)表水(shui)(shui)、生(sheng)活(huo)污水(shui)(shui)和不含對微生(sheng)物有明顯毒害作用的工業廢水(shui)(shui)中(zhong)BOD的(de)測定。
1.3 干擾及消(xiao)除(chu)
　　水中以下物質(zhi)對本方法(fa)測定不產生(sheng)明顯(xian)干擾的zui大允(yun)許量為： 5mg/L； 5 mg/L； 4 mg/L； 5 mg/L； 2 mg/L； 2 mg/L ； 5 mg/L； 5 mg/L； 0.5 mg/L； 0.05 mg/L；懸浮物(wu)250 mg/L。對含有(you)游(you)離(li)氯或結合氯的樣品可加入1.575g/L的(de)亞硫酸鈉溶液使樣(yang)品中游離氯或結合氯失效，應(ying)避免添加過(guo)量。對微生(sheng)物膜內菌(jun)種有毒(du)害作用的(de)高(gao)濃度殺菌(jun)劑(ji)、農藥類的(de)污水(shui)不適用本測定方(fang)法。
2 術語
2.1 生化需氧(yang)量
　　在(zai)一定條件下，微(wei)生物(wu)分解(jie)存在(zai)于水中(zhong)的某些可被氧(yang)化物(wu)質，特別是(shi)有機(ji)物(wu)所進行(xing)的生物(wu)化學過(guo)程中(zhong)消耗溶解(jie)氧(yang)的量。
2.2 微生物菌膜(mo)
　　將絲孢酵母菌(jun)在保持(chi)其生(sheng)理(li)機能(neng)的狀態下封入膜中，稱之(zhi)為微生(sheng)物菌(jun)膜或固定化微生(sheng)物膜。
2.3 微生物傳(chuan)感(gan)器(qi)
　　微(wei)生物(wu)傳感器是由(you)氧電極(ji)和固定化(hua)微(wei)生物(wu)膜組成(cheng)。可檢測微(wei)生物(wu)在降解有機物(wu)時引(yin)起的(de)氧濃(nong)度的(de)變化(hua)。
2.4 流通(tong)式
　　水(shui)樣或(huo)清(qing)洗液(ye)(ye)在蠕動泵的作用下連續(xu)不(bu)斷(duan)地將(jiang)樣品(pin)或(huo)清(qing)洗液(ye)(ye)在單位時(shi)間內(nei)按一定量(liang)比(bi)連續(xu)不(bu)斷(duan)地被送入測量(liang)池中。
2.5 間斷式(shi)（加入式(shi)）
　　將緩沖(chong)溶液加(jia)入(ru)到測(ce)量池中，使微生(sheng)物傳感器（微生(sheng)物菌膜(mo)）與緩沖(chong)溶液保持接觸狀態，然后(hou)加(jia)入(ru)定(ding)量的(de)被(bei)測(ce)水樣，測(ce)得被(bei)測(ce)水樣的(de)BOD值。
2.6 恒(heng)溫控制(zhi)裝(zhuang)置
　　微生(sheng)物電極的反應性能(neng)依(yi)賴(lai)于一(yi)定的溫度(du)條件(jian)，因此要(yao)求在試驗(yan)過程中要(yao)有一(yi)穩定的溫場。該(gai)裝置在儀器中稱之(zhi)為恒溫控制裝置。
2.7 清洗(xi)液(ye)（緩(huan)沖溶液(ye)）
　　清(qing)洗液是由(you)磷酸二(er)氫鉀和磷酸氫二(er)鈉配制而成。其(qi)主要作用(yong)是作為緩沖液調節樣品的pH值，清洗和維持微生物傳感器(qi)使其正常工作，并(bing)具(ju)有沉降重金屬離(li)子的作用。
3 原理
　　測(ce)定水中BOD的微生物傳感器是由氧電極和微生物菌膜構成，其原理是當含有飽和溶解氧的樣品進入流通池中與微生物傳感器接觸，樣品中溶解性可生化降解(jie)的有機物(wu)受到微生物(wu)菌(jun)膜(mo)中菌(jun)種的作用(yong)，而消耗一定量的氧，使擴散到氧電極表(biao)面上氧的質量減少。當樣品中可生化降解(jie)的有機物(wu)向菌(jun)膜(mo)擴散速(su)度（質量） 達到恒定(ding)時(shi)，此時(shi)擴散到氧(yang)(yang)電(dian)極表面上(shang)氧(yang)(yang)的質量(liang)也(ye)達到恒定(ding)，因此產生(sheng)一個(ge)恒定(ding)電(dian)流(liu)(liu)。由于恒定(ding)電(dian)流(liu)(liu)的差(cha)值與氧(yang)(yang)的減(jian)少(shao)量(liang)存(cun)在定(ding)量(liang)關系，據此可換(huan)算(suan)出樣品中生(sheng)化需氧(yang)(yang)量(liang)。
4 試(shi)劑
　　分析純試劑(ji)和蒸(zheng)餾水(shui)，蒸(zheng)餾水(shui)使用前應煮沸(fei)2-5min左右，放置室溫后使用。
4.1 磷(lin)酸鹽緩沖溶液(ye)：0.5mol/L
　　將68g磷(lin)酸(suan)二氫鉀（ ）和134g磷酸氫(qing)二鈉（ ）溶于蒸餾水中,
　　稀釋至1000ml，備用。此溶液的(de)pH值約7左(zuo)右。
4.2 磷酸鹽緩沖使用液（清(qing)洗液）：0.005mol/L
4.3 鹽酸（HCL）溶液：0.5mol/L
4.4 氫氧化鈉（NaOH）溶液：20g/L
4.5 亞硫酸鈉(na)（ ）溶液(ye)：1.575g/L，此溶液不穩(wen)定，臨使(shi)用前配制。
4.6 葡萄(tao)糖—谷氨酸標4.7 準溶液
　　稱(cheng)取在103℃下干燥(zao)1小時(shi)并冷卻至室溫(wen)的無水葡萄糖（ ）和谷氨酸（ ）各(ge)1.705g，溶于(yu)4.2中磷酸鹽(yan)緩沖溶液的(de)使用(yong)液中，并用(yong)此溶液稀釋至1000ml混合均(jun)勻即得(de)2500mg/L的(de)BOD標準溶液。
4.7 葡萄糖—谷氨酸標準使用(yong)溶液（臨用(yong)前(qian)配(pei)制）
　　取4.6中標準10.00 ml置(zhi)于250ml容(rong)量瓶(ping)中，用0.005 mol / L磷酸鹽(yan)緩沖使用液定容至標(biao)準(zhun)線(xian)，搖勻，此溶(rong)液濃度(du)為100mg/L。
5 儀器
　　使(shi)用(yong)的玻璃(li)儀器(qi)及塑料容器(qi)要認真清洗，容器(qi)壁上(shang)不能存有毒(du)或生物(wu)可降解的化合(he)物(wu)，操作(zuo)中應防(fang)止污(wu)染。
5.1 微生物傳(chuan)感(gan)器BOD快(kuai)速測定儀。
5.2 微生(sheng)物菌(jun)(jun)膜(mo)：微生(sheng)物菌(jun)(jun)膜(mo)內(nei)菌(jun)(jun)種應(ying)均勻，膜(mo)與膜(mo)之間應(ying)盡(jin)可能(neng)一(yi)致。其保(bao)存方法(fa)能(neng)濕(shi)法(fa)保(bao)存也可在室溫下干燥(zao)保(bao)存。微　　生(sheng)物菌(jun)(jun)膜(mo)的連續使用壽命應(ying)大于30d。
5.3 微(wei)生物菌(jun)膜的(de)活化：將微(wei)生物菌(jun)膜放入(ru)0.005mol/L磷酸鹽緩沖使用液中浸泡48h以上，然(ran)后將其安裝(zhuang)在微生物傳感器上。
5.4 10L聚乙稀塑料(liao)桶。
6 樣品(pin)的(de)貯存
　　樣(yang)品(pin)采集后不能在2h內分析時，則應在低(di)于0℃～4℃ 的(de)條件下保存，并在6h內分(fen)析，當不能(neng)在6h內分析時，則應將貯(zhu)存時間(jian)和溫(wen)度(du)與分析結果一起報
 

出。無論在任何條件下貯存決不能超過24h。
7 操作步驟
7.1 樣品的預處理
7.1.1 樣品的中和
　　如果樣品的pH值不在4-10之間，可用鹽酸溶液（4.3）或氫氧化鈉溶液（4.4），將樣品中和至pH值7左右即可。
7.1.2 測試樣品的準備7.1.3
　　（1）將樣品放置至室溫。
　　（2）地表水樣品可不用稀釋（無特殊情況）直接按7.3.3做樣品測定。
　　（3）生活污水和工業廢水可根據經驗或預期BOD值確定稀釋倍數，使其BOD值控制在50mg/L以下后作為待測樣品。
7.2 測定步驟
7.2.1 測定前應先開啟儀器，用磷酸鹽緩沖使用液（4.2）清洗微生物傳感器至電位E。（或電流I。）穩定。
7.2.2 工作曲線的繪制
　　（1）取5支50ml具塞比色管，分別加入葡萄糖—谷氨酸標準使用溶液（4.7）1.50ml；3.50ml；7.50ml；12.50ml；25.00ml，用0.005mol/L磷酸鹽緩沖使用液（4.2）稀釋至標線，搖勻。
　　（2）進樣分別測出電位E。（或電流I。）差值（此差值與BOD濃度成正比）。
　　（3）用5個不同標準溶液的濃度對應電位差△E（或電流差△I）繪制工作曲線。
7.2.3 樣品的測定
　　取預處理后樣品50ml加入0.5ml 0.5mol/L磷酸鹽緩沖溶液（4.1）搖勻后進行測定。
8 結果表示
　　直接讀取儀器顯示測定濃度值或由工作曲線計算出濃度值。
　　精密度和準確度
　　四個實驗室分析BOD含量為25.3mg/L、10.3mg/L的統一分發標準溶液，其分析結果如下：
　　實驗室內相對標準偏差為3.0%、2.6% 。
　　實驗室間相對標準偏差為3.5%、2.7% 。
　　四個實驗室測定50.6mg/L統一已知BOD樣品，相對誤差為-2.0%～2.8% 。

注意事項：
1.由于進樣量可調控，但無論何種情況單個樣品的進樣量不應小于10ml。
2.為縮短測定周期，將水樣中BOD值稀釋至25mg/L左右為宜。
3．測定BOD水樣的貯存條件同GB7488-87，6。